분야별실험법
[Microbiology] 식품공전-장염비브리오
실험방법
1) 증균배양 - 검체 25 g 또는 25 mL를 취하여 225 mL의 Alkaline Peptone Water를 가한 후 35~37℃에서 18~24시간 증균배양
2) 분리배양 - 증균배양액을 TCBS Agar에 접종하여 35~37℃에서 18~24시간 배양한다. 배양결과 직경 2~4 mm인 청록색의 sucrose 비분해 집락에 대하여 확인시험을 실시
3) 확인시험 - 분리배양된 평판배지상의 집락을 Triple Sugar Iron Agar, Lysine Indole Motility Medium, 2% NaCl을 첨가한 Nutrient Agar에 각각 접종한 후 35~37℃에서 18~24시간 배양 (장염비브리오는 Triple Sugar Iron Agar에서 사면부가 적색, 고층부는 황색, 가스가 생성되지 않으며 LIM배지에서 Lysine Decarboxylase 양성, Indole 생성, 운동성 양성, Oxidase시험 양성)
(Difco & BBL Manual 참조-BD Korea 협조)
4) 확인시험 - 장염비브리오로 추정된 균은 0, 3, 8 및 10% NaCl을 가한 Alkaline Peptone Water에 의한 내염성시험 실시, MR-VP Medium 배지를 이용한 VP 시험 실시, Mannitol 이용성시험(Purple Broth Base + 1% Mannitol), Arginine 및 Ornithine 분해시험(Moeller Basal Broth + 1% Arginine 또는 1% Ornithine), ONPG(O-nitrophenyl-β-D-galacto-pyranoside Broth)시험을 실시