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Experimental methods

분야별실험법

[Microbiology] 식품공전-리스테리아 모노사이토제네스

리스테리아 모노사이토제네스

  

 

실험방법

1) 증균배양

가공식품,

수산물

1. 가공식품 및 수산물에 대해서는 증균배지로 Listeria Enrichment Broth를 사용하며, 검체 25 g(mL)를 취하여 225 mLListeria 증균배지를 가한 후 30에서 48시간 배양

유가공품,

식육가공품, 알가공품,

식육, 가금류

1. 검체 25g(mL)Listeria Enrichment Broth, PALCAM Broth 또는 UVM Modified Listeria Enrichment Broth 225 mL에 접종하여 30에서 24±2시간 동안 증균 배양

2. 배양액 0.1 ml10mlFraser Broth Base에 접종하여 3537에서 2448시간 2차 증균을 실시

 

2) 분리배양 - 증균배양액을 Oxford Medium Base 또는 LPM (Lithium Chloride Phenylethanol Moxalactam) Agar 또는 PALCAM Medium Base 또는 ALOA agar에 접종하여 3537에서 2448시간 배양

Oxford Medium Base

Palcam Medium Base

(Difco & BBL Manual 참조-BD Korea 협조)

 

3) 분리배양 - 의심집락이 확인되면 이를 0.6% yeast extract가 포함된 Tryptic Soy Agar에 접종하여 30에서 2448시간 배양

4) 확인시험 - 그람염색 후 그람양성 간균이 확인되면 hemolysis, motility, catalase, CAMP testmannitol, rhamnose, xylose의 당분해시험을 실시

5) 확인시험 - β-hemolysis를 나타내고 catalase 양성, motility 양성을 나타내며 CAMP test결과 Staphylococcus aureus(ATCC 25923)에서 양성, Rhodococcus equi(ATCC 6939)에서 음성으로 나타나는 동시에 당분해시험 결과 mannitol 비분해, rhamnose 분해, xylose 비분해의 결과를 보일 경우 Listeria monocytogenes 양성으로 판정

 

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