실험방법

1) 배양배지를 제거

2) 배지 중 혈청의 영향을 없애기 위하여 PBS로 세포층을 씻어냄 (washing)

3) Trypsin/EDTA를 첨가

4) CO2 인큐베이터에서 2-10분간 정치 후 세포의 탈착을 현미경으로 파악

5) Serum 성분이 포함된 Media를 첨가하여 Trypsin/EDTA의 활성을 멈춤

6) Conical Centrifuge Tube에 옮겨 원심분리(1500rpm, 2-3min)를 돌린 뒤 상층액을 제거

7) 50ul 정도를 취해 세포수를 계측 후 부유액의 농도가 1 x 104 ~ 1 x 105 cells/mL가 되도록 희석

7) 남은 Pellet을 PBS로 washing 후 Media에 현탁(suspension)

8) 이 용액을 Cell Culture Flask/Dish에 옮겨담고 Media를 채워줌

9) CO2 인큐베이터에서 3일간 배양